Решение о регистрации выдано: Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций. ЭЛ № ФС 77 - 68501, от 27 января 2017.
Live and bio-abiotic systems
ISSN 2308-9709 (Online)
Научное электронное периодическое издание
Южного федерального университета

Влияние нового биологически активного препарата «Эмбриоприм» на микробиоценоз кишечника собак при экспериментальном дисбактериозе

УДК: 579.62
DOI: 10.18522/2308-9709-2012-1-5
335
Разработан и испытан новый биологически активный препарат «Эмбриоприм», рекомендуемый для коррекции нарушений микробиоценоза кишечника и устранения сопутствующих им функциональных расстройств организма у животных. Основным микробным компонентом препарата является сублимированная культура Lactobacillus acidophilus ЕР 317\402 ЕР 317\402, а немикробная субстанция представлена активированной эмбрионально-яичной массой кур и вспомогательными компонентами (измельченной скорлупой куриного яйца и янтарной кислотой). Эмбриоприм оказывает выраженное положительное влияние на облигатную, а также подавляющее действие на патогенную микрофлору кишечника экспериментальных животных, что свидетельствует о его высоких симбиотических свойствах.

Ключевые слова:

New biologically awake preparation «Embrioprim», recommended for correction of breaking of microbiocenosis of an intestine and elimination of functional distresses of an organism accompanying them at animals is developed and tested. The basic microbial ingredient of a preparation is sublimed culture Lactobacillus acidophilus ЕР 317\402 ЕР 317\402, and not microbial substance is introduced by the activated is embryonal-egg mass of hens and auxiliary ingredients (the minced shell of an egg and amber acid). Embrioprim on obligate, and also overwhelming action the expressed positive impact makes on a pathogenic microflora of an intestine of experimental animals that testifies to its high symbiotic properties.

Keywords:

В последние десятилетия 20 века широкая практика использования антибиотиков и экологическое неблагополучие окружающей среды привели к радикальной смене микроокружения в сообществе живых организмов. Эволюционно созданный в процессе естественного отбора устойчивый бактериальный микробиоценоз исчез, нарушилось эндоэкологическое равновесие, созданное в ходе эволюции в пользу вирусного и грибкового микроокружения, на которое антибактериальные средства действия не оказывают [12, 13]. На фоне общности перечня и механизмов влияния многочисленных внешних и внутренних факторов проблема дисбиоза и дисбактериоза стала общей для человека и животных. Обозначилась острая необходимость изучения микробиоценоза живого организма и поиска все более эффективных методов его коррекции [1, 2, 4, 5, 6, 7, 10].

В связи с этим разработка новых препаратов на основе штаммов микробов, формирующих нормальную микрофлору кишечника, является в настоящее время актуальной и значимой [3, 11, 14, 15].

В настоящее время бактериальные препараты, рекомендуемые для коррекции микрофлоры желудочно-кишечного тракта у млекопитающих, представлены широчайшим перечнем эубиотиков, пребиотиков, пробиотиков и симбиотиков. Именно симбиотики и пребиотики в последнее время представляются наиболее перспективными при лечении и профилактике дисбактериоза. Анализ показывает, что в основу большинства наиболее эффективных препаратов симбиотического действия входят различные штаммы лактобактерий и их метаболитов. Это обусловлено многочисленными биологическими свойствами лактобактерий. Кроме того, лактобактерии — это микроорганизмы, которые достаточно легко культивируются как в лабораторных, так и в производственных условиях. В то же время известно, что лечебное действие существующих препаратов, включая пробиотики, пребиотики и симбиотики, зависит не только от набора факторов антагонистической активности и иммуномодулирующих свойств их штаммов, но и от оригинальных дополнительных ингредиентов.

С учетом вышеизложенного нами разработан и испытан новый биологически активный препарат «Эмбриоприм» (патент РФ № 230368), рекомендуемый для коррекции нарушений микробиоценоза кишечника и устранения сопутствующих им функциональных расстройств организма у животных. Основным микробным компонентом препарата является сублимированная культура Lactobacillus acidophilus ЕР 317\402 ЕР 317\402, а немикробная субстанция представлена эмбрионально-яичной массой кур, активированной по оригинальной авторской технологии и вспомогательным компонентом — измельченной скорлупой куриного яйца, кальций которой переводится, в процессе взаимодействия с добавленной в препарат янтарной кислотой, в активную, легко усвояемую форму.

С учетом сложности патогенеза дисбиоза и дисбактериоза, критериями оценки эффективности коррекционных мероприятий, прежде всего, служит восстановление нормального состава микрофлоры толстого кишечника или положительная динамика в его количественных и качественных характеристиках, что сопровождается улучшением общего состояния человека или животного, положительной динамикой биохимических, гематологических, иммунологических показателей крови. Поэтому в качестве ведущей характеристики оценки влияния нового препарата на организм нами выбраны бактериологические показатели кишечного содержимого экспериментальных животных.

Материал и методы исследования: с целью изучения эффективности препарата поэтапно были отобраны 30 условно здоровых собак различных пород в возрасте двух месяцев. Использование животных раннего возраста сводило к минимуму вероятность воздействия посторонних факторов и обеспечивало идентичность рациона кормления. Перед началом эксперимента провели бактериологические исследования содержимого кишечника всех собак, затем на протяжении 10 дней применяли перорально антибиотик — доксициклина гидрохлорид в дозе 2 мг/кг один раз в сутки. Через пять дней после скармливания антибиотика исследования качественного и количественного состава микроорганизмов кишечника повторили.

Затем всем собакам на протяжении 20 дней применяли новый препарат «Эмбриоприм», с последующим контролем бактериологических показателей содержимого кишечника. Все эксперименты на животных проводились в соответствии с правилами защиты позвоночных животных, используемых в научных целях [8, 9].

Полученные результаты свидетельствуют, что до начала курса антибиотикотерапии показатели микробиоценоза соответствовали установленной возрастной норме. Десятидневный курс доксициклина гидрохлорида вызвал у щенков дисбактериоз второй-третьей степени. У 100% щенков после приема антибиотика существенно увеличилось содержание грибов рода кандида, при этом число колоний на агаре Сабуро в чашках Петри достигало 100 и более. В то время как до приема антибиотика грибы рода кандида обнаруживались в значительно меньшем количестве (в среднем 15 колоний на чашке Петри) лишь у 13% животных.

У животных, при проведении бактериологического контроля эффективности применения эмбриоприма, полученные результаты сравнивали с показателями микробиоценоза до и после приема антибиотиков. Из результатов, представленных в таблице 1 следует, что все основные представители индигенной микрофлоры (бифидо-, лактобактерии, бактероиды) выделялись у 100% животных на всех этапах эксперимента. Однако их количество после применения эмбриоприма не только возросло по сравнению с периодом после применения антибиотика (соответственно в 2,5, 1,7 и 2,1 раза), но и превысило на 0,11 lg КОЕ/г, 0,32 lg КОЕ/г и 0,39 lg КОЕ/г соответственно, количественные показатели содержания этих микроорганизмов до начала эксперимента.

Таблица 1 — Влияние препарата «Эмбриоприм» на бактериальные показатели микробиоценоза кишечника у щенков с экспериментальным антибиотикассоциированным дисбактериозом.

Микрофлора

Время исследования кишечного содержимого щенков

до приема антибиотиков, n=30

 

через 5 сут. после курса доксициклина гидрохлорида, n=30

через 5 сут. после окончания курса приема «Эмбриоприма», n=30

Кол-во

lg КОЕ/г

Выделено,

гол.(%)

Кол-во

lg КОЕ/г

Выделено,

гол.(%)

Кол-во

lg КОЕ/г

Выделено,

гол.(%)

Патогенные микробы семейства кишечных

0

0

0

0

0

0

Бифидобактерии

8,78±0,74**

30 (100)

3,46±0,33

30 (100)

8,89±0,65**

30 (100)

Бактероиды

5,63±0,61**

30 (100)

3,23±0,47

30 (100)

5,95±0,57**

30 (100)

Лактобактерии

8,95±0,49**

30 (100)

4,52±0,51

30 (100)

9,34±0,56**

30 (100)

Эшерихии

с норм. ферм. акт-ю

со сниж. ферм. акт-ю

лактозонегативные

гемолитические

 

6,47±0,43**

0

0

0

 

30 (100)

0

0

0

 

3,28±0,83

4,65±0,37

3,66±0,52

3,15±0,63

 

30 (100)

30 (100)

30 (100)

19 (63)

 

5,90±0,58**

0

0

0

 

30 (100)

 

 

 

Энтерококки

6,83±0,56*

30 (100)

3,18±1,23

30 (100)

6,13±0,54*

30 (100)

УПЭ

Klebsiella

Hafnia

Enterobacter

Proteus

Serratia 

Clostridium

 

0

0

2,32±0,36*

0

0

0

 

0

0

21 (70)

0

0

0

 

3,56±0,32

0

5,72±0,71

4,17±0,46

0

2,21±0,57

 

8 (27)

 

30 (100)

6 (20)

 

7 (23)

 

0

0

3,11±0,28*

0

0

0

 

 

 

16 (53)

 

 

 

Стафилококки

St. aureus

 St.  epidermidis

 

0

0

 

0

0

 

1,87±0,34

4,25±0,39

 

2 (7)

5 (17)

 

0

1,69±0,24**

 

 

2 (7)

Дрожжеподобные грибы

0,84±0,23**

4 (13)

6,22±0,81

30 (100)

0,77±0,31**

6 (20)

(Р<0,05), ** (Р<0,005) — в сравнении с показателями после курса антибиотикотерапии

Применение препарата повлияло на спектр эшерихий в пользу кишечных палочек с нормальными ферментативными свойствами. Их количество увеличилось в 1,8 раз по сравнению с периодом после применения антибиотика. Количество энтерококков повысилось в 1,9 раз по сравнению с периодом после выпаивания доксициклина гидрохлорида, и приблизилось к показателям до применения антибиотиков. Одним из важных результатов является выраженное снижение частоты выделяемости грибов рода кандида — у 6 щенков из 20. После курса приема эмбриоприма показатель содержания грибов рода кандида снизился до уровня, отмеченнного перед приемом антибиотика. Качественные показатели условно-патогенных энтеробактерий (УПЭ) после использования препарата такие же, как до начала эксперимента. В количественном отношении отмечены положительные тенденции, заключающиеся в уменьшении на 47% числа животных, у которых выделен энтеробактер. При этом количество собак с наличием этого микроорганизма в содержимом кишечника, в результате использования препарата, стало даже на 17% меньше, чем до применения антибиотика. После приема эмбриоприма высевается эпидермальный стафилококк только у 2 (7%) щенков, а патогенный золотистый стафилококк отсутствуют.

Выводы: таким образом, анализируя данные, представленные в таблице, можно сделать вывод о том, что препарат «Эмбриоприм» оказывает выраженное положительное влияние на облигатную, а также подавляющее действие на патогенную микрофлору кишечника экспериментальных животных, что свидетельствует о его высоких симбиотических свойствах.

Список литературы

  1. Барановский, А. Ю. Дисбактериоз и дисбиоз кишечника / А. Ю. Барановский, Э. А. Кондрашина. — СПб: Питер, 2000.
  2. Блохина, И. Н. Дисбактериозы / И. Н. Блохина, В. Г. Дорофейчук. — Л.: Медицина, 1979.
  3. Бондаренко, В. М. Дисбактериозы кишечника у взрослых / В. М. Бондаренко, Н. М. Грачева, Т. В. Мацулевич. — М.: KMK Scientific Press, 2003.
  4. Гребенев, А. Л. Болезни кишечника (современные достижения в диагностике и терапии) / А. Л. Гребенев, Л. П. Мягкова. — М.: Медицина, 1994.
  5. Красноголовец, В. Н. Дисбактериоз кишечника и его клиническое значение / В. Н. Красноголовец. — М.: Медицина, 1979.
  6. Овод, А. С. Направленное формирование бактериоценоза кишечника / А. С. Овод // Ветеринария. — 2003. — № 2 — С. 23—26.
  7. Петенко, А. И. Многокомпонентный бактериальный препарат для животноводства с пробиотическими свойствами / А. И. Петенко, В. А. Ярошенко, А. Г. Кощаев // Мат. междунар. науч.-практ. конф. «Биоресурсы, биотехнологии, инновации Юга России» (Ставрополь-Пятигорск, 21—24 октября 2001 г.). — Ставрополь: Изд-во СГУ, 2003. — Ч. 2. — С. 39—41.
  8. Рекомендации Комитетам по этике, проводящим экспертизу биомедицинских исследовании. — Женева, 2000.
  9. Руководства и рекомендации для Европейских независимых комитетов по вопросам этики // Европейский форум по качественной клинической практике. — Брюссель, 1995, 1997.
  10. Тимченко, Л. Д. Экологически безопасные методы лечения и коррекции состояния здоровья продуктивных животных / Л. Д. Тимченко, И. С. Тюменцева, Е. Н. Афанасьев // Мат. междунар. науч.-практ. конф. «Биоресурсы, биотехнологии, инновации Юга России» (Ставрополь-Пятигорск, 21—24 октября 2001 г.). — Ставрополь: Изд-во СГУ, 2003. — Ч. 2. — С. 159—162.
  11. Хайруллов, Р. Г. Применение пробиотика «Спас» для профилактики и лечения желудочно-кишечных болезней: автореф. дис. … канд. биол. наук / Р. Г. Хайруллов. — Казань, 2007.
  12. Черешнев, В.А., Морова А.А., Рямзина И. Н. Биологические законы и жизнеспособность человека (метод многофункциональной восстановительной терапии) / В. А. Черешнев, А. А. Морова, И. Н. Рямзина. — Россия — Чехия, 2000.
  13. Черешнев, В. А. Причины и последствия разрушения природной экологической системы «макроорганизм — эндосимбионтные бактерии», выработанной в процессе эволюции и естественного отбора / В. А. Черешнев, Я. С. Циммерман, А. А. Морова // Клиническая медицина. — 2001. — № 9. — С. 4—8.
  14. Venturi, A. Impact on the composition of the faecal flora by a new probiotic preparation: preliminary data on maintenance treatment of patients with ulcerative colitis / A. Venturi, P. Gionchetti, F. Rizzella et al. // Aliment. Pharmacol. Ther. — 1999. — Vol. 13. — № 8. —P. 1103—1108.
  15. Zivkovic, R. Probiotics or microbes against microbesl / R. Zivkovic // Acta Med. Croatica. — 1999. — Vol. 53. — № 1. — P. 23–28.